Post by alamin1144 on Aug 2, 2023 0:34:09 GMT -5
大于60%的sgRNA1和sgRNA2（序列见补充表S3 ）。sgRNA1、sgRNA2 (NEB, E2040S) 和 Cas9 mRNA (NEB, E2060S) 在体外转录并纯化 (Omega, R6247-010)。 Cas9 mRNA/sg NSun2通过原核显微注射递送。浓度为100/50 ng/μL。通过合子注射在小鼠胚胎中敲除NSun2 ，获得NSun2双等位基因突变小染。最终获得Δ56 bp小鼠用于后续研究。我们组直接保藏了所有相
关质粒。最后，将NSun2缺陷型小鼠培育亚洲手机号码列表到B6D2F1/Crl背景中并通过杂合交配维持。 苏木精和伊红染色 新鲜组织用固定剂（4％PFA）固定24小时以上，用分级乙醇脱水，并浸入蜡中。将蜡块切成4μm厚的片。将石蜡切片脱蜡并浸泡在水中。然后将切片浸入 Harris 苏木精（Servicebio，G1005）中 3-8 分钟。
切片用1%盐酸洗涤分化数秒。重新清洗切片后，用0.6%氨水使。切片在伊红染色缓冲液中染色 1-3 分钟。然后将切片脱水至透明，然后用中性树胶密封。在显微镜下收集图像，检查，然后分析。 肝功能检查 采集小鼠血液，4℃保存过夜，3000× g离心15分钟 。吸去上清液，测定相应